环介导等温扩增技术快速检测脑膜炎奈瑟菌属方法的建立

李海清 邵祝军 朱兵清 李马超 高源

引用本文: 李海清, 邵祝军, 朱兵清, 李马超, 高源. 环介导等温扩增技术快速检测脑膜炎奈瑟菌属方法的建立[J]. 疾病监测, 2010, 25(5): 397-400. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2010.05.018 shu
Citation:  LI Hai-qing, SHAO Zhu-jun, ZHU Bing-qing, LI Ma-chao and GAO Yuan. Establishment of LAMP-based rapid detection of Neisseria meningitides[J]. Disease Surveillance, 2010, 25(5): 397-400. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2010.05.018 shu

环介导等温扩增技术快速检测脑膜炎奈瑟菌属方法的建立

    作者简介: 李海清,男,山西省阳泉市人,大学,主要从事微生物检验工作;
    通信作者: 高源, gaoyuan7921@yahoo.com.cn
  • 基金项目: 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治(No.2008ZX10004-002)

摘要: 目的 应用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术建立一种快速敏感的脑膜炎奈瑟氏菌属检测方法。 方法 针对脑膜炎奈瑟菌属(ctrA)基因序列的6个区域设计4条LAMP 引物(2条内引物、2条外引物),同时设计2条环引物,并对反应条件和反应体系进行优化。分别验证该方法的特异性及敏感性,并与普通PCR进行了比较。 结果 在适宜反应条件所设计引物对脑膜炎奈瑟菌的扩增的特异性及敏感性均较好,与普通PCR方法比较, LAMP敏感性比普通PCR 高10倍。 结论 LAMP 检测速度相比PCR 更快速,在60 min 内即可完成扩增反应。实验建立的LAMP方法能够快速、灵敏、特异地检测脑膜炎奈瑟氏菌,适合基层检验部门及小型实验室与现场监测等使用。

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通信作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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